בדיקת רטרווירוס

שיטות זיהוי

עקרונות השיטה

מיקוד רגולטורי

בדיקת טיפוח משותף

שיטה זו משתמשת בתאי אינדיקטור רגישים כדי ללכוד חלקיקים ויראליים מדבקים וקובעת את מצב הזיהום על ידי התבוננות בתופעות כמו השפעות ציטופטיות, היווצרות מוקד או ביטוי אנטיגן ספציפי. זה יכול להדגים נוכחות של חלקיקים רטרו-ויראליים זיהומיים.

• יעדי בדיקה חובה: תאי EOPC או תאי{0}}ייצור מוגבלים.

• הליך בדיקות ליבה: יש להשתמש במערכת דו-שלבי- תרבות משותפת (שלב הגברה ויראלית ושלב אינדיקטור פעילות).

• דרישות תאים רגישים: בהתאם למין ולמקור של התאים הנבדקים, יש להשתמש בשורות תאים רגישות שונות או מרובות עבור מבחני זיהום רטרו-ויראליים.

• דרישות מעבר תרבות: מערכת התרבות המשותפת חייבת לעבור לפחות 5 פעמים (בדרך כלל יותר) כדי להבטיח הגברה נאותה של הנגיף הפוטנציאלי.

מיקרוסקופיה אלקטרון העברה

שיטה זו משתמשת במיקרוסקופ אלקטרוני של העברה ברזולוציה גבוהה- כדי לצפות ישירות במורפולוגיה ובמבנה של חלקיקים נגיפיים (כגון מבנה המעטפת האיקוסהדרלית הטיפוסי ומורפולוגיה נוקלאוקפסיד), המאפשרת זיהוי ויזואלי וניתוח כמותי. הוא יכול לזהות חלקיקים ויראליים ידועים ולא ידועים, כולל חלקיקים שאינם-משכפלים או כאלה שלא נלכדו במבחני הדבקות.

• יעדי בדיקה חובה: תאי EOPC או תאי{0}}ייצור מוגבלים.

• דרישת ליבה: יש לזהות את סוג וכמות החלקיקים הרטרו-ויראליים.

• דרישות לדוגמא: נדרשת חתך דק במיוחד, המצריך בדרך כלל תצפית שיטתית של לפחות 200 תאים.

• הוראות מיוחדות (Chinese Pharmacopoeia 2025): עבור תאי מכרסמים מסוימים (למשל, CHO, BHK-21) או תאי חרקים, יש לקבוע גם את כמות החלקיקים הנגיפים בנוזל הקציר ואת מידת ההדבקה שלהם.

Assay Transcriptase הפוך

בהתבסס על המאפיין של תעתיק הפוך המזרז את הסינתזה של DNA מתבנית RNA, ניתן לקבוע בעקיפין את נוכחותם של רטרו-וירוסים על ידי זיהוי האותות הרדיואקטיביים או הפלורסנטים של תוצרי התגובה כדי לכמת את פעילות האנזים. שיטה זו אינה תלויה בזיהום נגיפי ויכולה לסנן באופן רחב עבור חלקיקים ויראליים בעלי פעילות אנזימטית.

• הסבר פטור: גם ICH Q5A(R2) וגם הפרמקופיה הסינית (מהדורת 2025) מציינים בבירור שבדיקה זו אינה נדרשת עבור תאים הידועים כמייצרים רטרו-וירוסים (כגון תאים מסוימים של מכרסמים, חרקים ועופות).

• דרישות חלופיות: במקרים של פטור יש לבצע בדיקה מקיפה יותר לסוג חלקיקי הנגיף, כמותם ומידבקותם.

PCR או שיטות ספציפיות אחרות במבחנה

בהתבסס על הספציפיות למין של תאים, כאשר תוצאות פעילות התעתיק ההפוכה אינן ברורות או לא ניתן למדוד, ניתן להשתמש בשיטות זיהוי רטרו-וירוס ספציפיות-, כגון PCR של רטרו-וירוס, אימונופלואורסצנטי, ELISA וכו'. ניתן להשתמש ב-PCR כמותי של רטרו-וירוסים גם לכימות חלקיקי רטרו-וירוס.

• מיקום ראשוני: משמש בדרך כלל כתוספת חשובה לשיטות הליבה שהוזכרו לעיל וכלי לאישור ספציפיות.

• תרחישי יישום: משמש בדרך כלל לזיהוי וכימות רגישים ביותר של וירוסים ידועים ספציפיים (למשל, qPCR), או כדי לספק ראיות ברמה המולקולרית-כאשר תוצאות זיהומים/מיקרוסקופיה אלקטרוניות מוטלות בספק.

• בסיס רגולטורי: היישום שלו דורש אימות יסודי ועליו לעמוד בהנחיות הרלוונטיות לאימות שיטות זיהוי ספציפיות בשוק היעד (למשל, הפרמקופאה הסינית (מהדורת 2025)).

שירותים מקצועיים

הגנה מקיפה בשבילך

גישת ציות גלובלית

שיטות הבדיקה שלנו משולבות בצורה עמוקה עם דרישות הליבה של ICH Q5A(R2), Pharmacopoeia הסינית (2025), USP ו-EP, ומספקות שירות-יחידה המכסה בדיקות זיהומיות, מיקרוסקופיה אלקטרונית שידור (TEM) וזיהוי פעילות תמלול הפוכה, התומכים ביעילות באפליקציות בו-זמנית בארה"ב ובאירופה, כולל סין, ארה"ב ובאירופה.

יכולת זיהוי-בספקטרום רחב

יש לנו מגוון של קווי תאים רגישים ושיטות בוגרות לתרחישי סיכון שונים, שיכולים לזהות ביעילות פתוגני מטרה כולל רטרו-וירוסים של עכברים, טרופייזם רטרו-וירוסים ורטרו-וירוסים של חרקים, מה שמבטיח את הספקטרום הרחב והספציפיות של הזיהוי.

פלטפורמת מיקרוסקופיה אלקטרונית משלו

יש לנו מיקרוסקופ אלקטרוני שידור אלקטרוני ברזולוציה גבוהה-שלנו וצוות טכני מקצועי בכיר כדי להשיג בקרת איכות-סגורה לאורך כל התהליך מהכנת הדגימה ועד פלט הנתונים. אנו יכולים גם לספק שירותים כמותיים מהירים לחומרי גלם (UPB) כדי לתמוך במדויק באימות פינוי וירוסים במורד הזרם.

אימות שיטה מקיף

כל השיטות מבוצעות תחת תקני GMP/GLP, תוך הקפדה מוחלטת על הפרמקופאה הסינית (מהדורת 2025) ו-ICH Q2(R2) לאימות מקיף של ספציפיות, מגבלות זיהוי וכו'. אנו מספקים ניהול פרויקטים מלא- מתכנון פרוטוקול ועד תמיכה באפליקציות, תוך הבטחת תאימות ואמינות נתונים.

הגנה על שלמות נתונים

מקבלה לדוגמה וביצוע ניסוי ועד הוצאת דיווח, הקמנו מערכת איכות מלאה התואמת לעקרונות GMP ו-ALCOA+. באמצעות סקירת נתונים מקצועית מרובת רמות- ומנגנון בקרת סטייה חזקה (CAPA), אנו מבטיחים ביסודו של דבר איכות- גבוהה וניתנת לביקורת עבור כל פרויקט.